植物培養(yǎng)基好比土壤，是組織培養(yǎng)中離體材料賴以生存和發(fā)展的基地。因此，在組織培養(yǎng)的各個環(huán)節(jié)中，應(yīng)著重掌握培養(yǎng)基，了解它的組成和配制方法。 植物培養(yǎng)基的配制操作步驟:
?、俑鶕?jù)配方要求，用量筒或移液管從每種母液中分別取出所需的用量，放入同一燒杯中，并用粗天平稱取蔗糖、瓊脂放在一邊備用。
?、趯ⅱ僦蟹Q好的瓊脂加蒸餾水300~400毫升，加熱并不斷攪拌，直至煮沸溶解呈透明狀，再停止加熱。
?、蹖ⅱ僦兴〉母鞣N物質(zhì)(包括蔗糖)，加入煮好的瓊脂中，再加水至1000毫升，攪拌均勻，配成培養(yǎng)基。
?、苡?N的氫氧化鈉或鹽酸，滴入③中的培養(yǎng)基里，每次只滴幾滴，滴后攪拌均勻，并用pH試紙測其pH值，直到將培養(yǎng)基的pH值調(diào)到5.8。
⑤將配好的培養(yǎng)基，用漏斗分裝到三角瓶(或試管)中，并用棉塞塞緊瓶口，瓶壁寫上號碼。瓶中培養(yǎng)基的量約為容量的1/4或1/5。
培養(yǎng)基的成分比較復(fù)雜，為避免配制時忙亂而將一些成分漏掉，可以準(zhǔn)備一份配制培養(yǎng)基的成分單，將培養(yǎng)基的全部成分和用量填寫清楚。配制時，按表列內(nèi)容順序，按項(xiàng)按量稱取，就不會出現(xiàn)差錯。成分單的格式與內(nèi)容見表9-2。
植物培養(yǎng)基的保存方法：
培養(yǎng)基配制完畢后，應(yīng)立即滅菌。培養(yǎng)基通常應(yīng)在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，在汽相120℃條件下，滅菌20分鐘。如果沒有高壓蒸汽滅菌鍋，也可采用間歇滅菌法進(jìn)行滅菌，即將培養(yǎng)基煮沸10分鐘，24小時后再煮沸20分鐘，如此連續(xù)滅菌三次，即可達(dá)到*滅菌的目的。
經(jīng)過滅菌的培養(yǎng)基應(yīng)置于10℃下保存，特別是含有生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)基，在4~5℃低溫下保存要更好些。含吲哚乙酸或赤霉素的培養(yǎng)基，要在配制后的一周內(nèi)使用完，其它培養(yǎng)基多也不應(yīng)超過一個月。在多數(shù)情況下，應(yīng)在消毒后兩周內(nèi)用完。
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